Pendahuluan
Teknik kultur jaringan adalah salah satu teknik perbanyakan tanaman secara vegetatif di luar tubuh tanaman (in vitro) dalam kondisi aseptik dengan menggunakan bagian tanaman seperti akar, batang, daun, atau tunas yang disebut eksplan.
Eksplan ditumbuhkan dalam media buatan yang mengandung nutrisi dan zat pengatur tumbuh yang diperlukan agar dapat tumbuh dan berkembang. Oleh karena itu, pemilihan dan penyiapan eksplan yang tepat menentukan keberhasilan teknik kultur jaringan.
Bagian Tumbuhan yang Digunakan sebagai Eksplan
Beberapa bagian tumbuhan yang biasa digunakan sebagai eksplan dalam kultur jaringan antara lain:
1. Ujung Pucuk
Ujung pucuk merupakan bagian vegetatif tumbuhan yang masih aktif membelah diri sehingga sangat responsif terhadap zat pengatur tumbuh. Ujung pucuk juga relatif bebas patogen sehingga baik digunakan sebagai eksplan.
2. Tunas Ketiak Daun
Tunas ketiak daun atau tunas aksilar banyak mengandung sel-sel meristem yang masih muda sehingga memiliki potensi regenerasi tinggi untuk ditumbuhkan dalam kultur.
3. Irisan Batang
Irisan batang khususnya yang berasal dari batang muda mengandung banyak sel meristem lateral yang dapat digunakan untuk induksi kalus atau tunas adventif.
4. Daun
Sel-sel tepi daun atau petiol daun dapat digunakan sebagai sumber eksplan untuk induksi kalus atau embrio somatik pada beberapa jenis tanaman.
Persiapan Eksplan
Sebelum ditanam, eksplan harus melalui beberapa tahap persiapan agar bebas kontaminan dan siap ditumbuhkan, antara lain:
1. Sterilisasi Permukaan
Eksplan dicuci dengan sabun/deterjen dan dibilas, lalu direndam dalam larutan pemutih (NaOCl) atau alkohol 70% selama beberapa menit.
2. Pencucian
Eksplan dibilas beberapa kali dengan air steril untuk menghilangkan sisa bahan kimia.
3. Pemotongan Eksplan
Eksplan dipotong kecil-kecil sesuai ukuran yang dibutuhkan (5-10 mm) dengan menggunakan alat steril.
4. Penanaman ke Media
Eksplan siap ditanam ke dalam botol kultur berisi media tumbuh dengan kondisi aseptik di laminar air flow.
Faktor yang Mempengaruhi Keberhasilan Eksplan
Beberapa faktor yang mempengaruhi kemampuan eksplan untuk tumbuh dalam kultur jaringan:
- Jenis eksplan
- Umur dan ukuran eksplan
- Kondisi fisiologis tanaman induk
- Sterilisasi eksplan
- Komposisi media tumbuh
Jika faktor-faktor tersebut diperhatikan, maka peluang keberhasilan kultur jaringan akan semakin tinggi.
Kesimpulan
Eksplan merupakan bagian tumbuhan yang sangat penting dan menentukan keberhasilan teknik kultur jaringan. Pemilihan jenis eksplan yang tepat serta persiapan yang baik agar bebas kontaminan menjadi kunci keberhasilan kultur jaringan.
Beberapa bagian tumbuhan yang umum digunakan sebagai sumber eksplan antara lain ujung pucuk, tunas ketiak daun, irisan batang, dan daun. Persiapan eksplan meliputi sterilisasi permukaan, pencucian, pemotongan ukuran tertentu, dan penanaman ke media secara aseptik.
Dengan memahami hal tersebut, diharapkan teknik kultur jaringan dapat dilakukan dengan optimal untuk mendapatkan hasil perbanyakan tanaman yang maksimal.
